Search In this Thesis
   Search In this Thesis  
العنوان
The Possible Therapeutic Role of MSC Derived Exosomes Extracted from Myocardial Infarction Versus Healthy Rat Models in the Heart With Surgically Occluded Right Anterior Coronary Artery in Rats A Histological Study/
المؤلف
Farid ,Alaa Sabri
هيئة الاعداد
باحث / الاء صبري فريد
مشرف / ماهر محمد حسين عمارة
مشرف / سارة عبد الجواد السباعي
مشرف / إيمان علي نجم علي
تاريخ النشر
2024
عدد الصفحات
188 p:
اللغة
الإنجليزية
الدرجة
ماجستير
التخصص
علم الأنسجة
تاريخ الإجازة
1/1/2024
مكان الإجازة
جامعة عين شمس - كلية الطب - Histology and Cell Biology
الفهرس
Only 14 pages are availabe for public view

from 191

from 191

Abstract

Myocardial infarction (MI), commonly known as a heart attack, occurs when blood flow decreases or stops to the coronary arteries of the heart, causing damage to the heart Muscle. The most common symptom is chest pain or discomfort which may travel into the shoulder, arm, back, neck or jaw. Often it occurs in the center or left side of the chest and lasts for more than a few minutes. MI may cause heart failure, an irregular heartbeat, cardiogenic Shock or cardiac arrest. Aim: this study is designed to compare between the therapeutic role of autologous exosomes versus homologous exosomes on surgically induced myocardial infarction model in adult male albino rats.
Material and Methods: Fifty adult male albino rats weighing 150–250 gm were included with age from 8 to 11 old months in the study. In addition, ten rats weighing 150 gm with age from 7 to 8 old weeks were used for adipose derived exosomes preparation. The rats were divided into the following three groups: group I: control group, group II: myocardial infarction group; rats were subjected to right ……….(RACO Technique), group III: rats were subjected to permanent RACO technique as in group II then rats were further subdivided into two subgroups; Subgroup IIIa received autologous exosomes ( MI rat) in tail vein on the 2nd day of the experiment and Subgroup IIIb received homologous( healthy rat) exosomes in tail vein on the 2nd day of the experiment.
Results: group II showed disruption of cardiomyoctes which appeared deeply acidophilic and darkly stained nuclei with loss of the intercalated discs and muscle striations. Immunohistochemical stain revealed a significantly increased reaction to iNOS antibodies, caspase-3 antibodies, anti -PCNA and positive anti-VEGF in comparison to control group. group III; including subgroups IIIa and IIIb; showed preservation of the myocardium integrity. However, subgroup IIIa revealed significant increase in anti-VEGF and decrease in iNOS antibodies as compared to subgroup
IIIb.
Conclusion: Both exosomes from healthy rats and exosomes from rats with
MI showed therapeutic and anti-inflammatory effects in surgically induced MI. These effects were more prominent in exosomes from rats with MI than healthy rats as detected by microscopic, morphometric, and statistical studies.
يحدث احتشاء عضلة القلب، المعروف باسم النوبة القلبية، عندما يتناقص تدفق الدم أو يتوقف إلى الشريان التاجي للقلب، مما يتسبب في تلف عضلة القلب. وأفيد أن السبب الأكثر شيوعا لاحتشاء عضلة القلب هو انسداد الشريان التاجي. التدخلات الإدارية العدوانية المستخدمة في علاجها مثل التدخل التاجي عن طريق الجلد وتطعيم مجازة الشريان التاجي تشارك أيضًا في هذا المعدل المرتفع من المراضة والوفيات. لذا، هناك ضرورة حاسمة لتحقيق علاج طويل الأمد أكثر أمانًا وملاءمة. تركز معظم الدراسات حاليًا على إصلاح الأنسجة وتجديدها، وتعد الخلايا الجذعية الوسيطة من بين الموضوعات البحثية الأكثر شيوعًا. يمكن استخدام الخلايا الجذعية الوسيطة كخلايا بذرة، وهي تمثل أحد الموضوعات الساخنة الحالية في أبحاث الطب التجديدي.
نظرًا لأن السيتوكينات الموجودة في الأنسجة المصابة تعزز توجيه الخلايا الجذعية والسلفية، فقد تم تصميم هذه الدراسة للمقارنة بين الدور العلاجي للإكسوسومات المشتقة من الفئران المصابة باحتشاء عضلة القلب المستحث جراحيًا مقابل الإكسوسومات المشتقة من الفئران السليمة.
تم تضمين خمسين من الفئران البيضاء البالغة بوزن 150-250 جرام في الدراسة. بالإضافة إلى ذلك، تم استخدام عشرة فئران بوزن 150 جرام بعمر 7 إلى 8 أسابيع لتحضير الإكسوسومات المشتقة من الدهن. بعد فترة التأقلم، تم تقسيم الحيوانات عشوائيًا إلى ثلاث مجموعات: المجموعة الأولى: كانت بمثابة مجموعة ضابطة، وتم تقسيمها أيضًا إلى أربع مجموعات فرعية متساوية. المجموعة الثانية: كانت هذه المجموعة بمثابة مجموعة احتشاء عضلة القلب التي خضعت لتقنية انسداد الشريان التاجي الأمامي الأيمن الدائم لتحريض احتشاء عضلة القلب. المجموعة الثالثة: كانت بمثابة مجموعة معالجة بالإكسوسومات. تم إخضاع هذه المجموعة لتقنية انسداد الشريان التاجي الأمامي الأيمن الدائم كما هو الحال في المجموعة الثانية، ثم سيتم تقسيم الفئران إلى مجموعتين فرعيتين: المجموعة الفرعية IIIa: الفئران التي تم حقنها بالإكسوسومات المشتقة من الفئران المصابة باحتشاء عضلة القلب المستحث جراحيًا. المجموعة الفرعية IIIb: الفئران المحقونة بالإكسوسومات المشتقة من الأصحاء.
تم ذبح جميع الحيوانات بعد 28 يوم من التجربة.
تم توصيف الإكسوسومات باستخدام المجهر الإلكتروني النافذ. في نهاية التجربة تم جمع عينات القلب وتعريضها للهيماتوكسيلين والأيوسين وحمض شيف الدوري وحمض ماسون ثلاثي الألوان. كما تم استخدام التقنية المناعية الهيستوكيميائية للكشف عن المستضد النووي الخلوي المتكاثر، سينسيز أكسيد النيتريك المحفز، الكاسبيز 3 وعامل نمو بطانة الأوعية الدموية.
تم إجراء القياسات المورفومترية والإحصائية.
أظهر الفحص النسيجي للأجزاء الملطخة بالهيماتوكسيلين والإيوسين في المجموعة الثانية انقطاعًا وانحطاطًا في ألياف عضلة القلب مع زيادة كثرة اليوزينيات السيتوبلازمية وفقدان التصدعات. كما لوحظ وجود ارتشاح خلوي التهابي ونواة تخللية، وكانت هناك ألياف متدهورة مع زيادة كثرة اليوزينيات ومناطق من الإفرازات، ونواة تخللية، وأوعية دموية محتقنة متوسعة، وتسرب عدد خلايا الدم الحمراء والعديد من الخلايا الليفية، ومع ذلك، اتساع المساحات بين الخلايا مع الخلايا الليفية النشطة.
أظهر فحص المقاطع الملطخة بحمض شيف الدوري من المجموعة الثانية زيادة في شدة تفاعل حمض شيف الدوري في المنطقة المحيطة بالنواة والأقراص المقحمة غير المحددة بشكل جيد وفقدان التصدعات.
في المقاطع الملونة ثلاثية الألوان في ماسون في المجموعة الثانية أظهرت زيادة في كمية ألياف الكولاجين المرتبة بشكل غير منتظم.
أظهرت المقاطع الكيميائية المناعية الخلوية المضادة للتكاثر في المجموعة الثانية عددًا قليلًا من تفاعل المستضد النووي الخلوي الإيجابي داخل نواة الخلايا العضلية.
أظهرت المقاطع الملطخة الكيميائية المناعية الكيميائية المناعية لأكسيد النيتريك المحفز في المجموعة الثانية تفاعلًا إيجابيًا قويًا لسينسيز أكسيد النيتريك المضاد للتحفيز على شكل حبيبات بنية في سيتوبلازم الخلايا العضلية.
أظهر قسم عضلة القلب المصبوغ Caspase-3 في المجموعة الثانية تفاعلًا مناعيًا إيجابيًا قويًا لـ caspase 3.
أظهر عامل نمو بطانة الأوعية الدموية أقسام عضلة القلب الملطخة في المجموعة الثانية من عضلة القلب تفاعلًا مناعيًا + للخلايا الالتهابية والخلايا البطانية.
أظهرت المقاطع الملطخة بالهيماتوكسيلين والإيوسين في المجموعة الفرعية IIIa انخفاضًا واضحًا في تلف عضلة القلب الناجم عن احتشاء عضلة القلب. ظهرت معظم ألياف عضلة القلب في نواة حويصلية طبيعية مع السيتوبلازم الحمضي الشاحب مع الحد الأدنى من الأوعية الدموية المتوسعة مع القرص المقحم السليم. وقد لوحظت الخلايا الليفية وعدد قليل من التسلل الخلوي.
أظهر فحص المقاطع المصبوغة بحمض شيف الدوري في المجموعة الفرعية IIIa تفاعلًا خفيفًا للجليكوجين في المنطقة المحيطة بالنواة، وهو قرص مقحم محدد جيدًا. يتم الحفاظ على التشقق في الخلايا العضلية.
في مقاطع ماسون ثلاثية الألوان المصبوغة في المجموعة الفرعية IIIa تظهر كمية قليلة من ألياف الكولاجين بين ألياف عضلة القلب.
أظهرت المقاطع الكيميائية المناعية للمستضد النووي الخلوي المضاد للتكاثر في المجموعة الفرعية IIIa تفاعلًا إيجابيًا متعددًا للمستضد النووي الخلوي المضاد للتكاثر داخل نواة العديد من الخلايا العضلية.
أظهرت المقاطع الملطخة بالكيمياء المناعية الكيميائية المناعية لأكسيد النيتريك المحفز في المجموعة الفرعية IIIa بعض التفاعلات الإيجابية لسينسيز أكسيد النيتريك المضاد للتحفيز في شكل حبيبات بنية في سيتوبلازم الخلايا العضلية.
أظهرت أقسام عضلة القلب الملطخة بـ Caspase-3 في المجموعة الفرعية IIIa تفاعلًا مناعيًا في عدد قليل من ألياف عضلة القلب.
أظهر عامل نمو بطانة الأوعية الدموية أقسام عضلة القلب الملطخة في المجموعة الفرعية IIIa تفاعلًا مناعيًا +5 للخلايا البطانية المبطنة للعديد من الأوعية الدموية.
أظهرت المقاطع الملطخة بالهيماتوكسيلين والإيوسين في المجموعة الفرعية IIIb بعض مناطق الألياف المتدهورة بين الألياف الطبيعية تقريبًا. ظهرت النوى بيضاوية ومركزية وحويصلية. عدد قليل من الارتشاحات الخلوية الالتهابية بين الألياف العضلية، والأوعية الدموية المتوسعة مع عدد قليل جدًا من النوى المنكمشة، والقرص المقحم المعطل مع السيتوبلازم المحب للحموضة المخطط وعدد خلايا الدم الحمراء المتضخم.
يُظهر فحص المقاطع المصبوغة بحمض شيف الدوري في المجموعة الفرعية IIIb زيادة معتدلة في تفاعل الجليكوجين في المنطقة المحيطة بالنواة، وهو قرص مقحم محدد جيدًا. يتم الحفاظ على التشقق في الخلايا العضلية.
في المقاطع الملونة ثلاثية الألوان في ماسون في المجموعة الفرعية IIIb أظهرت القليل من ألياف الكولاجين المرتبة بشكل غير منتظم.
أظهرت المقاطع الكيميائية المناعية للمستضد النووي الخلوي المضاد للتكاثر في المجموعة الفرعية IIIb تفاعلًا إيجابيًا متعددًا للمستضد النووي الخلوي المضاد للتكاثر داخل نواة العديد من الخلايا العضلية.
أظهرت المقاطع الملطخة بالكيمياء المناعية الكيميائية المناعية لأكسيد النيتريك المحفز في المجموعة الفرعية IIIb الحد الأدنى من التفاعلات الإيجابية لسينسيز أكسيد النيتريك المضاد للتحفيز في شكل حبيبات بنية في سيتوبلازم الخلايا العضلية.
أظهرت المقاطع الملطخة بـ Caspase-3 في المجموعة الفرعية IIIb التفاعل المناعي السيتوبلازمي لبعض ألياف عضلة القلب.
أظهرت المقاطع الملطخة بعامل نمو بطانة الأوعية الدموية في المجموعة الفرعية IIIb من عضلة القلب تفاعلًا مناعيًا +5 للخلايا البطانية المبطنة للعديد من الأوعية الدموية