الفهرس | Only 14 pages are availabe for public view |
Abstract يؤدي ارتفاع مقاومة العديد من الميكروبات للمضادات الحيوية بدون مضادات فعالة للوقاية والعلاج من العدوى إلى تعريض صحة الإنسان لخطر كبير. بروتين الدفنسين (ببتيد) (Defensin Peptide) النباتي عبارة عن ببتيدات كاتيونية صغيرة غنية بالسيستين وهيكله الرباعي الأبعاد ذو درجة ثبات عالية لاحتوائه على روابط كبريتية ثنائية. ومن المعروف أن لهذا البروتين نشاطا مضادا للعديد من الميكروبات. تم في هذا البحث استخلاص جين الدفنسين من أوراق نبات الفاصوليا في صورة الرنا المرسال (mRNA) وتم تحويله إلى الدنا المكمل (cDNA) بإنزيم النسخ العكسي حيث تم تحميله على أحد ناقلات التعبير الجيني، وتم إدخال الناقل في بكتريا القولون (E.coli) ليسهل فصل وتنقية الببتيد المكمل (Recombinant peptide) الناتج من الدنا معاد الإتحاد (Recombinant DNA). تلى ذلك فصل وتنقية الببتيد النباتي بطريقة الفصل الكروماتوجرافي. تم إجراء تقنية الطبعة (التشنيف) الخاصة بالبروتينات (Western Blot) في وجود أجسام مضادة تخصصية للكشف عن البتيد النباتي المرتبط. بعد الحصول على الببتيد النباتي في صورة نقية (وزنه الجزيئي حوالي 5كيلو دالتون)، تم إجراء تجربة للكشف عن نشاطه ضد العديد من الميكروبات البكتيرية (Klebsiella spp. , E. coli and Staphylococcus aureus) والفطرية (Aspergillus flavus and MDR Candida albicans) التي تصيب الإنسان والممقاومة للعديد من المضادات الحيوية. وقد أظهر الببتيد النباتي كفاءة ملحوظة في نشاطه المثبط للميكروبات المستخدمة في الدراسة. |