الفهرس 
IntroductionOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 211 |  |  |
| | | from | 211 | | |
Abstract
يعد سرطان الكبد واحدًامن أكثر الأورام الخبيثة شيوعًا في جميع أنحاء العالم حيث يحتل المركز الخامس بين انواع السرطانات المسببة للموت فى العالم حيث يتم تشخيص 70000 حالة سرطان كبد جديدة سنويا. يحدث سرطان الكبد عادة فى حالات الكبد المتليف ولكن هناك عوامل تساهم في إحداث هذا المرض وأهمها فيروسات الكبد بى وسى ومرض الكبد الكحولى بالاضافة الى مرض الكبد الدهنى الغير كحولى.ونظرا لمضاعفات العلاج الكيمائى والإشعاعى فى علاج السرطانات فكانت الحاجة لاتجاه الباحثين لإيجاد بدائل لمثل هذه العلاجات ومن هذه البدائل العلاج الفيروسى.ولذلك كان الهدف من إجراء هذه الرسالة هو دراسة التأثير الكيميائى والمناعى للقاح النيوكاسل لمعرفة مدى كفائته ودوره العلاجى المحتمل والتحسنى في الجرذان المحدث بها سرطان الكبد بواسطة ثنائى إيثيل نيتروز الأمين.وقد أجريت هذه الدراسة على عدد 75 من ذكور الجرذان البيضاء وتتراوح أعمارها من 5-6 أسبوع وأوزانها بين 80- 120 جرام. وقد تم وضع هذه الجرذان فى أقفاص معدنية منفصلة بحجرة خاصة لرعاية حيوانات التجارب بقسم الكيمياء الحيوية بالكلية وأبقيت الجرذان على ظروف بيئية وغذائية ثابتة طوال 7 أيام للتأقلم على الظروف المعملية قبل بداية التجربة .هذا وقد تم تقسيم الجرذان إلى خمس مجموعات متساوية اشتملت كل مجموعة على عدد 15 جرذا وتم توزيعها كالأتي:1) المجموعة الأولي ( المجموعة الضابطة الطبيعية): اشتملت على 15 جرذا لم تعط أي أدوية واستخدمت كمجموعة ضابطة للمجموعات الأخرى.2)المجموعة الثانية (المجموعة المحدث بها مرض سرطان الكبد): تكونت من15 جرذا تم اعطاؤهم داي إيثيل نيتروز أمين عن طريق الحقن فى الغشاء البريتيوني للبطن بتركيز 200 مللي جرام/كيلوجرام ثلاث مرات بفاصل اسبوعين بين كل مرة والأخرى.3)المجموعة الثالثة (المجموعة العلاجية بالدوكسوروبسين): اشتملت على 15 جرذا تم اعطاؤهم داي إيثيل نيتروز أمين عن طريق الحقن فى الغشاء البريتيوني للبطن بتركيز 200 مللي جرام/كيلوجرام ثلاث مرات بفاصل اسبوعين بين كل مرة والأخرى.وفى الأسبوع العاشر تم علاجهم بدواء الديكسوروبسين عن طريق الحقن فى الغشاء البريتيوني للبطن بتركيز2 مللي جرام/كيلوجرام مرة واحدة.4)المجموعة الرابعة (المجموعة العلاجية بلقاح النيوكاسل هيتشنر ب 1):اشتملت على 15 جرذا تم اعطاؤهم داي إيثيل نيتروز أمين عن طريق الحقن فى الغشاء البريتيوني للبطن بتركيز 200 مللي جرام/كيلوجرام ثلاث مرات بفاصل اسبوعين بين كل مرة والأخرى. و فى الأسبوع العاشر تم علاجهم بلقاح النيوكاسل ( هيتشنر ب 1 ) عن طريق الحقن فى الغشاء البريتيوني للبطن بتركيز 710وحدة/ جرذ مرة واحدة.5) المجموعة الخامسة (المجموعة العلاجية بالدوكسوروبسين وفيروس النيوكاسل هيتشنرب1) :اشتملت على 15 جرذا تم اعطاؤهم داي إيثيل نيتروز أمين عن طريق الحقن فى الغشاء البريتيوني للبطن بتركيز 200 مللي جرام/كيلوجرام ثلاث مرات بفاصل اسبوعين بين كل مرة والأخرى. وفى الأسبوع العاشر تم علاجهم بدواء الديكسوروبسين عن طريق الحقن فى الغشاء البريتيوني للبطن بتركيز2 مللي جرام/كيلوجرام مرة واحدة ولقاح النيوكاسل ( هيتشنر ب 1 ) عن طريق الحقن فى الغشاء البريتيوني للبطن بتركيز710 وحدة/ جرذ مرة واحدة.العينات:تم تجميع عينات دم عشوائية وعينات من الأنسجة (الكبد) تم تجميعها من جميع مجموعات الجرذان ( الضابطة والمصابة) بعد الأسبوع الثالث عشر من بدايه التجربة.عينات الدم :تم جمع عينات الدم من الجيب الوريدي خلف العين وذلك لفصل المصل فى نهاية التجربة وذلك بعد صيام طوال 18ساعة فى انابيب جافة ونظيفة ومعقمة محكمة الإغلاق وترك العينة نصف ساعه حتى تتجلط ثم فصل المصل بواسطة جهاز الطرد المركزي وذلك عند سرعة 3000 لفة في الدقيقة لمدة 15 دقيقة بعدها تم جمع المصل في أنابيب جافة ومعقمة بواسطة ماصة اتوماتيكية وتم حفظ المصل في المجمد عند درجة 20˚ مئوية تحت الصفر وذلك لإجراء التحاليل البيوكيميائية الخاصه بتركيز(الألانين امينو ترانسفيريز، الاسبارتيت امينو ترانسفيريز، الفوسفاتيز القلوي، جاما جلوتاميل ترانسفيريز، البروتين الكلى، الالبيومين،البيليروبين الكلى اليوريا ،الكرياتينين ، اللاكتيت ديهيدروجينيز ، ألفا فيتو بروتين ، الانترلوكين 6، عامل التنخر الورمي ألفا).عينات الانسجة :بعد الحصول على الكميات الكافية من الدم، تم ذبح الفئران وفتح البطن وفصل الكبد ثم غسله جيداً بمحلول ملح فسيولوجي (0.9%) ثم وضع جزء من أنسجه الكبد ووضعها في أنابيب إيبندورف وتم الاحتفاظ به على الفور في النيتروجين السائل وتخزينها في 80˚ تحت الصفر لقياس التعبير الجيني لكلا من:العامل النووي كابا ب ، و الكاسباس-3 ، وعامل سرطان الغدد الليمفاوية بيتا-2 ، و عامل النمو الكبدى ، و البروتين المثبط للورم ب53 و سيتوكروم بي 2 إي 1.عينات الهستوباثولوجى:بعد 13 إسبوع من بداية التجربةَ تم الفحص بالعين المجردة لكشف أى تغيرات طرأت على أنسجه الكلى لفئران المجموعات. ثم تم فصل جزء صغير من الكبد وتم حفظه فى محلول فورمالين متعادل 10% ، ثم تم تحضير العينات وصبغها بالصبغات الخاصة ووضعها على الشرائح ووضع الغطاء وتثبيته ، ثم تم فحصها ميكروسكوبياً وتوصيفها وتصويرها عن طريق متخصص فى علم الهستوباثولوجى.وقد أظهرت النتائج بعد تحليلها إحصائيا الآتي:أولا بالنسبة لنتائج التحاليل الكيميائيه الحيوية:بالنسبة لعينات المصل :1- نشاط الألانين أمينوترانسفيريز والأسبارتيت أمينو ترانسفيريز:أظهرت النتائج وجود زيادة معنوية في نشاط إنزيم الألانين أمينوترانسفيريز والأسبارتيت أمينو ترانسفيريز بمصل جرذان المجموعة المحدث بها مرض سرطان الكبد عند مقارنتها بجرذان المجموعة الضابطة الطبيعية. كما لوحظ حدوث نقص معنوي في نشاط إنزيم الألانين أمينوترانسفيريز والأسبارتيت أمينو ترانسفيريز بمصل جرذان المجموعات الثلاثة ( مجموعة الدوكسوروبسين ومجموعة الهتشنرب1 ومجموعة الدوكسوروبسين+الهتشنرب1 ) مقارنة بالمجموعة المصابة بسرطان الكبد.2- االفوسفاتيز القلوي والجاما جلوتاميل ترانسفيريز.حدثت زيادة معنوية في نشاط الفوسفاتيز القلوي والجاما جلوتاميل ترانسفيريز في مصل جرذان المجموعة المحدث بها مرض سرطان الكبد عند مقارنتها بجرذان المجموعة الضابطة الطبيعية.كما لوحظ حدوث نقص معنوي في نشاط الفوسفاتيز القلوي والجاما جلوتاميل ترانسفيريز بمصل جرذان المجموعات الثلاثة ( مجموعة الدوكسوروبسين ومجموعة الهتشنرب1 ومجموعة الدوكسوروبسين+الهتشنرب1 ) مقارنة بالمجموعة المصابة بسرطان الكبد. 3- البروتين الكلى والالبيومين:حدث نقص معنوي في تركيزالبروتين الكلى و تركيز الألبيومين في مصل جرذان المجموعة المحدث بها مرض سرطان الكبدعند مقارنتها بجرذان المجموعة الضابطة الطبيعية.كما لوحظ حدوث زيادة معنوية في تركيزالبروتين الكلى و الألبيومين بمصل جرذان المجموعات الثلاثة (مجموعة الدوكسوروبسين ومجموعة الهتشنرب1 ومجموعة الدوكسوروبسين+الهتشنرب1 ) مقارنة بالمجموعة المصابة بسرطان الكبد. 4- البيليروبين الكلي:حدثت زيادة معنوية في تركيزالبليروبين الكلي في مصل جرذان المجموعة المحدث بها مرض سرطان الكبدعند مقارنتها بجرذان المجموعة الضابطة الطبيعية.كما لوحظ حدوث نقص معنوي في تركيزالبيليروبين الكلي بمصل جرذان المجموعات الثلاثة (مجموعة الدوكسوروبسين ومجموعة الهتشنرب1 ومجموعة الدوكسوروبسين+الهتشنرب1) مقارنة بالمجموعة المصابة بسرطان الكبد.5-الكرياتينين واليوريا:حدثت زيادة معنوية في تركيزالكرياتينين و اليوريا في مصل جرذان المجموعة المحدث بها مرض سرطان الكبد عند مقارنتها بجرذان المجموعة الضابطة الطبيعية.كما لوحظ حدوث نقص معنوي في تركيز الكرياتينين و اليوريا بمصل جرذان المجموعات الثلاثة (مجموعة الدوكسوروبسين ومجموعة الهتشنرب1 ومجموعة الدوكسوروبسين+الهتشنرب1) مقارنة بالمجموعة المصابة بسرطان الكبد.6-نشاط اللاكتيت ديهيدروجينيز:حدثت زيادة معنوية في نشاط اللاكتيت ديهيدروجينيز في مصل جرذان المجوعة المحدث بها مرض سرطان الكبدعند مقارنتها بجرذان المجموعة الضابطة الطبيعية.كما لوحظ حدوث نقص معنوي بنشاط اللاكتيت ديهيدروجينيز بمصل جرذان المجموعات الثلاثة (مجموعة الدوكسوروبسين ومجموعة الهتشنرب1 ومجموعة الدوكسوروبسين+الهتشنرب1) مقارنة بالمجموعة المصابة بسرطان الكبد. 7- ألفا فيتو بروتين:حدثت زيادة معنوية في تركيز الألفا فيتو بروتين في مصل جرذان المجموعة المحدث بها مرض سرطان الكبد عند مقارنتها بجرذان المجموعة الضابطة الطبيعية.كما لوحظ حدوث نقص معنوي في تركيز الألفا فيتو بروتين بمصل جرذان المجموعات الثلاثة (مجموعة الدوكسوروبسين ومجموعة الهتشنرب1 ومجموعة الدوكسوروبسين+الهتشنرب1 ) مقارنة بالمجموعة المصابة بسرطان الكبد. 8- إنترلوكين 6:حدثت زيادة معنوية في تركيز الإنترليكين 6 في مصل جرذان المجموعة المحدث بها مرض سرطان الكبد عند مقارنتها بجرذان المجموعة الضابطة الطبيعية.كما لوحظ حدوث نقص معنوي في تركيز الإنترليكين 6 بمصل جرذان المجموعات الثلاثة (مجموعة الدوكسوروبسين ومجموعة الهتشنرب1 ومجموعة الدوكسوروبسين+الهتشنرب1 ) مقارنة بالمجموعة المصابة بسرطان الكبد.9- عامل التنخر الورمى ألفا:حدثت زيادة معنوية في تركيز عامل التنخر الورمى ألفا في مصل جرذان المجموعة المحدث بها مرض سرطان الكبدعند مقارنتها بجرذان المجموعة الضابطة الطبيعية.كما لوحظ حدوث نقص معنوي في تركيز عامل التنخر الورمي ألفا بمصل جرذان المجموعات الثلاثة ( مجموعة الدوكسوروبسين ومجموعة الهتشنرب1 ومجموعة الدوكسوروبسين+الهتشنرب1 ) مقارنة بالمجموعة المصابة بسرطان الكبد.بالنسبة لعينات النسيج :1- العامل النووى كابا ب:أظهرت النتائج وجود زيادة معنوية فى مستوى التعبير الجينى في العامل النووى كابا ب فى نسيج كبد الفئران المحدث بهامرض سرطان الكبد عند مقارنتها بجرذان المجموعة الضابطة الطبيعية.كما أوضحت الدراسة حدوث نقص معنوى فى مستوى التعبير الجينى في العامل النووى كابا ب فى نسيج كبد الفئران المجموعات الثلاثة ( مجموعة الدوكسوروبسين ومجموعة الهتشنرب1 ومجموعة الدوكسوروبسين+الهتشنرب1 ) مقارنة بالمجموعة المصابة بسرطان الكبد. 2-الكاسباس -3:أظهرت النتائج وجود نقص معنوى فى مستوى التعبير الجينى في الكاسباس -3 فى نسيج كبد الفئران المحدث بهامرض سرطان الكبد عند مقارنتها بجرذان المجموعة الضابطة الطبيعية.كما أوضحت الدراسة حدوث زيادة معنوى فى مستوى التعبير الجينى في الكاسباس -3 فى نسيج كبد الفئران المجموعات الثلاثة ( مجموعة الدوكسوروبسين ومجموعة الهتشنرب1 ومجموعة الدوكسوروبسين+الهتشنرب1 ) مقارنة بالمجموعة المصابة بسرطان الكبد.3- سرطان الخلايا الليمفاوية بيتا -2:أظهرت النتائج وجود زيادة معنوية فى مستوى التعبير الجينى في سرطان الغدد الليمفاوية بيتا-2 فى نسيج كبد الفئران المحدثبهامرض سرطان الكبد عند مقارنتها بجرذان المجموعة الضابطة الطبيعية.كما أوضحت الدراسة حدوث نقص معنوى فى مستوى التعبير الجينى في سرطان الغدد الليمفاوية بيتا-2 فى نسيج كبد الفئران المجموعات الثلاثة (مجموعة الدوكسوروبسين ومجموعة الهتشنرب1 ومجموعة الدوكسوروبسين+الهتشنرب1) مقارنة بالمجموعة المصابة بسرطان الكبد. 4-عامل النمو الكبدى:أظهرت النتائج وجود نقص معنوى فى مستوى التعبير الجينى في عامل النمو الكبدى فى نسيج كبد الفئران المحدث بهامرض سرطان الكبد عند مقارنتها بجرذان المجموعة الضابطة الطبيعية.كما أوضحت الدراسة حدوث زيادة معنوية فى مستوى التعبير الجينى في عامل النمو الكبدى فى نسيج كبد الفئران المجموعات الثلاثة (مجموعة الدوكسوروبسين ومجموعة الهتشنرب1 ومجموعة الدوكسوروبسين+الهتشنرب1) مقارنة بالمجموعة المصابة بسرطان الكبد. 5- البروتين المثبط للورم ب53:أظهرت النتائج وجود نقص معنوى فى مستوى التعبير الجينى في البروتين المثبط للورم ب-53 فى نسيج كبد الفئران المحدث بهامرض سرطان الكبد عند مقارنتها بجرذان المجموعة الضابطة الطبيعية.كما أوضحت الدراسة حدوث زيادة معنوية مستوى التعبير الجينى في البروتين المثبط للورم ب-53 فى نسيج كبد الفئران المجموعات الثلاثة ( مجموعة الدوكسوروبسين ومجموعة الهتشنرب1 ومجموعة الدوكسوروبسين+الهتشنرب1 ) مقارنة بالمجموعة المصابة بسرطان الكبد. 6-السيتوكروم بى 2اى1:أظهرت النتائج وجود حدوث زيادة معنوية فى مستوى التعبير الجينى في السيتوكروم 2 اى 1 فى نسيج كبد الفئران المحدثبهامرض سرطان الكبد عند مقارنتها بجرذان المجموعة الضابطة الطبيعية.كما أوضحت الدراسة حدوث نقص معنوى مستوى التعبير الجينى في البروتين المثبط للورم ب-53 فى نسيج كبد الفئران المجموعات الثلاثة ( مجموعة الدوكسوروبسين ومجموعة الهتشنرب1 ومجموعة الدوكسوروبسين+الهتشنرب1 ) مقارنة بالمجموعة المصابة بسرطان الكبد.ثالثا-الفحص الهستوباثولوجى لانسجة الكبد:أظهر الفحص الهستوباثولوجى الأتي:المجموعة الأولى : المجموعة الضابطة الطبيعية:أفاد الفحص الهستوباثولوجي لفئران المجموعة الضابطة عن عدم وجود اي تغييرات مرضية في خلايا الكبد والتي ظهرت بصورة طبيعية . 2- المجموعة الثانية: (المجموعة المحدث بها سرطان الكبد):والتي تجرعت داي ايثيل نيتروزو فقد ظهرت تشوهات شديدة في خلايا نسيج الكبد والتي حل محلها خلايا سرطانية لها خصائص الخلايا السرطانية الخبيثة من حيث تغير في احجام واشكال النواه مع وجود بعض الانقسامات الطفيفة كما ظهرت خيوط ليفية بين الخلايا الكبدية والقناة الصفراوية محاطة بتفاعل ليفي.3- المجموعة الثالثة: (المجموعة العلاجية بالدوكسوروبسين):افاد الفحص الباثولوجي للمجموعة الثالثة والتي تجرعت داي ايثيل نيتروزو امين ثم تم علاجها بالدوكسوروبسين عن احتقان في اوعية الكبد مع احتفاظ الاطار العام للنسيج الكبدي بصورته الطبيعة وظهرت خلايا فونكوفير المتكاثرة و القناة الصفراوية المتكاثرة و المتليفة.4- المجموعة الرابعة: (المجموعة العلاجية بلقاح النيوكاسل هيتشنر ب 1):اظهر الفحص الباثولوجي للكبد الفئران التي اعطيت داي ايثيل نيتروزو امين ثم تم علاجها بالهتشنرب1 عن ظهور انسجة الكبد بصورة طبيعية مع وجود خلايا فونكوفير المتكاثرة واحتقان الجيب الجيبي المتوسع والنواة المتضخمة.5) المجموعة الخامسة (المجموعة العلاجية بالدوكسوروبسين ولقاح النيوكاسل هيتشنرب1):افاد الفحص الباثولوجي للمجموعة الخامسة والتي تجرعت داي ايثيل نيتروزو امين ثم تم علاجها بالدوكسوروبسين والهتشنرب1 معا عن وجود سرطان الخلايا الكبدية مع خلية كبدية واضحة والنواة الكبدية المتضخمة.الخلاصـــــــــــــــــة من هذه الدراسة نستنتج أن ثنائى ايثيل نيتروز الأمين كان له تأثير مدمر على خلايا الكبد ، مما أدى إلى حدوث سرطان الكبد. حيث اتضح وجود نقص فى الألبيومين والبوتين الكلى ، و الكاسباس-3 ، و عامل النمو الكبدى، و البروتين المثبط للورم ب53. من جهة اخرى أظهرت النتائج زيادة الألانين امينو ترانسفيريز، الاسبارتيت امينو ترانسفيريز، الفوسفاتيز القلوي، جاما جلوتاميل ترانسفيريز، اليوريا ،الكرياتينين ، اللاكتيت ديهيدروجينيز ، والألفا فيتو بروتين و عامل تنخر الورم الفا، و العامل النووى كابا ب ، و سرطان الغدد الليمفاوية بيتا -2، و السيتوكروم ب 2 اى 1. في مكونات الدم والأنسجة وكونها من النتائج المصاحبة لمرض سرطان الكبد.كما أوضحت الدراسة أن العلاج بالدوكسوروبسين أو لقاح النيوكاسل هتشنر ب1 كمواد علاجيه كان لها دور فعال في حماية الكبد من السرطان المحدث تجريبيا فى الجرذان بإستخدام ثنائى إيثيل نيتروز إستخدامه كذلك إلى الحفاظ على نسب الدلالات الكيميائية الحيوية المختلفة والتعبير الجينى فى الدم والأنسجة لما يقارب النسب الطبيعية ، و يرجع ذلك إلى فعالية كلا من الدوكسوروبسين أو لقاح النيوكاسل كعلاج للسرطان.لذلك توصى الدراسة بضرورة استخدام تلك المزايا الهائلة للقاح النيوكاسل هتشنرب1 كمواد علاجية مضادة للالتهابات والاورام و إدخالها كمواد فعالة فى صناعة العقاقير الطبية خاصة المستخدمة فى العلاج المحتمل لامراض السرطانات وخاصة المرضى المصابين بسرطان الكبد.