الفهرس 
IntroductionOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 116 |  |  |
| | | from | 116 | | |
Abstract
ينتشر فيروس طاعون المجترات الصغيرة فى أنحاء متعددة من العالم خصوصا فى شمال ووسط أفريقيا وكذلك فى الجزيرة العربية وجنوب غرب أسيا.وتشترك هذة المناطق فى كونها ذات أجواء حارة.ويتميز مرض طاعون المجترات الصغيرة بكونة شديد العدوى وكثيف من حيث حالات النفوق الناتجة عن الاصابة بالفيروس وأن نسبة الشفاء منة بعد الاصابة ضئيلة جدا مما يشكل عبئا اقتصاديا كبيرا على عاتق المربين لقطعان الماعز والأغنام.وتعتبر الطريقة المثلى لمواجهة هذا المرض تكمن فى الوقاية باستخدام لقاح حى مستضعف تم تحضيرة بتمرير الفيروس على خلايا الاستزراع النسيجى من نوع خلايا كلى القرد الأخضر الأفريقى (Vero cells).وهذا النوع من اللقاحات يتميز بفاعلية عالية ولكنة مثل أغلب اللقاحات الحية المستضعفة يعانى من الأحتياج الى التبريد المستمر (Cold chain) لذلك وجهت العديد من الدراسات لزيادة الثبات الحرارى لهذا اللقاح بطرق متعددة عن طريق اضافة بعض المواد للقاح أثناء خطوات التصنيع.تهدف هذة الدراسة لاستبيان دور مادتى الشيتوزان والكالسيوم فوسفات (فى صورة النانو المتناهية الصغر) فى امكانية انتاج لقاح محسن لفيروس طاعون المجترات الصغيرة من حيث زيادة الكفاءة التخزينية (الثبات الحرارى) وكذلك زيادة الكفاءة المناعية للقاح ولكن بعد التحقق من معدلات أمان هذة المواد ومدى تأثيرها على نمو خلايا الأستزراع النسيجى وكذلك نمو الفيروس فى هذة الخلايا. وقد أوضحت نتائج الدراسة الأتى:1-تم تحضير مادتى الشيتوزان والكالسيوم فوسفات فى صورة جزيئات نانو وتم عمل توصيف لهذة المواد باستخدام الميكروسكوب الألكترونى المقطعى (TEM) وقد أخذت المادتين الشكل الكروى بمتوسط حجم 85 نانوميتر(85X10-9 متر) للشيتوزان بينما كان الكالسيوم فوسفات بمتوسط حجم 150 نانوميتر(150X10- 9 متر)2-تم تحضير تركيزات مختلفة (10%، 5%، 1%) من مادتى النانو المضافة الى الوسط الغذائى (MEM) لخلايا الفيرو ومع المتابعة الميكروسكوبية على مدار أربعة أيام وجد أن تركيزات ال 10%، 5% كانت ذات تأثير سلبى كبير على نمو الخلايا بينما التأثير الأقل كان لتركيز 1% حيث أن الخلايا التى ظلت طبيعية بعد مرور أربعة أيام كانت لا تتعدى ال 50% فى حالة ال 1% CNP ولا تتعدى 60% فى حالة ال 1% CaPNP-تم تحضير تركيزات جديدة (1% ، 0.50% ،0.25% ،0.125%) وبعد متابعة أثرها على الخلايا لمدة أربعة أيام كانت أفضل النتائج فى حالة التركيز الأقل جدا وهو 0.125% وكان تأثر الخلايا بهذا التركيز فى كلا المادتين مقارب جدا للخلايا الضابطة والتى بلا اضافات (cell control) حيث أعطت 95% نسبة الخلايا الطبيعية من حيث النمو.3-عند اضافة التركيزات السابقة الذكر (0.5% ،0.10% ، 0.125%) للمادتين محل الدراسة الى خلايا محقونة بفيروس ال PPR أوضحت التجربة أيضا أن أداء الفيروس على الخلايا كان أفضل ما يكون بدون اضافات ثم يلى ذلك التخفيفات 0.125% لكلا المادتين وبأفضلية للشيتوزان.4-باضافة كلا من الشيتوزان والكالسيوم فوسفات فى صورة النانو الى الوسط الغذائى للخلايا أثناء تحضير لقاح ال PPRV وبعد عمل تحصين لمجموعات من الخراف (ثلاثة لكل تركيز) وبعد تجميع عينات دم من كل حيوان كل اسبوع ولمدة 4 أسابيع لتتبع وعمل عيارية للأجسام المضادة لدى الحيوانات المحصنة ومقارنة النتائج بحيوانات أخرى محصنة باللقاح التقليدى مع وجود ضابط للتجربة عبارة عن مجموعة من ثلاثة حيوانات غير محصنة على الاطلاق وكانت نتائج عمل ال SNT توضح افضلية تركيز ال CNP 0.125% من حيث السرعة حيث اعطى أعلى متوسط حسابى لمعيار الأجسام المضادة (GMT=10.6) والذى يعتبر نسبة واقية من المرض بعد أسبوع واحد فقط وكذلك 0.125% CNP اعطى اعلى متوسط لمعيار الأجسام المضادة بعد انتهاء أربعة أسابيع (GMT=128).فى حين كان أقل متوسط حسابى للأجسام المضادة فى حالة ال CaPNP (GMT=85.3) ويلية مجموعة لقاح ال PPR بدون اضافات (ضابط التجربة)حيث كان (GMT=64).
5-بدراسة تأثير الاضافات المذكورة عالية قبل عملية تجفيد اللقاح وبعدة وجد أن أقل فقد فى معيار اللقاح كنتيجة للتجفيد كان فى اللقاح المضاف الية مادة الشيتوزان بنسبة 0.125% (loss of titer =0.4 log 10 TCID50/ml) وبينما كان الفقد فى معيار الفيروس للدفعات الأخرى أكثر بقليل بما فى ذلك اللقاح الضابط للتجربة ( بدون أى اضافات).6-عند دراسة الثبات الحرارى للدفعات محل البحث وجد أنة عند حفظ اللقاح سواء فى درجة 4ºم أو 25ºم أو 37ºم وجد أن نفس دفعة اللقاح (الشيتوزان بنسبة 0.125%) قد أظهرت أقل فقد فى معيار اللقاح كالتالى (1.9, 3.5 and 3.5 log 10 TCID50/ml ) على الترتيب.ولذا من المرجح أنة تضاف مادة الشيتوزان النانو ذات التركيز (0.125%) الى مثبت اللقاح (اللاكت البيومين هيدرولايسات +السكروز) وذلك لزيادة كفاءة لقاح ال PPR من حيث احداث مناعة أعلى من اللقاح التقليدى وأيضا لحماية اللقاح أثناء عملية التجفيد ولزيادة الثبات الحرارى للقاح ةبخاصة فى الأجواء الحارة.