الفهرس 
IntroductionOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 131 |  |  |
| | | from | 131 | | |
Abstract
يعد التحصين امرا استراتيجيا هاما للوقايه من امراض انفلونزا الخيول والاجهاض المعدى للخيول والتيتانوس الى جانب اجراءات الامان الحيوى. لذلك و خلال هذه الدراسه تم تحضير وإختبار لقاح مركب ومثبط يحتوى على فيروسى إنفلونزا الخيول والإجهاض المعدى للخيول و توكسيد التتانوس والمحفز بالجل و الصابونين كالتالى :تم تحضيرفيروس لقاح انفلونزا الخيول من العتره المجفده والمعزوله محليا (A/equi2/Egypt /6066 NAMRU3-VSVRI/2008)و تمريره ثلاث تمريرات على البيض المخصب الخالى من المسببات المرضيه عمر (9-11) يوم وذلك بتمريرها مرتين على البيض المخصب الخالى من المسببات المرضيه عمر (9-11) يوم VEP5))0 تمت معايرة اللقاح المحضر وذلك بواسطة استخدام اختبار التلازن الدموى حيث اعطى اللقاح نشاط تلازن دموى بمقدار 11 log2 (HA unit/0.05ml). كما اعطى اللقاح قوه عياريه بمقدار( (10 log10 EID50/0.1 ml0 تم تثبيط الفيروس باستخدام بينارى ايثيلين امين تركيز نهائى (0,003) مول عند درجة حراره 37مئويه لمدة 24ساعه مع التقليب المستمر، كما تم اختبار النقاوه للقاح ووجد ان الفيروس المثبط خال من التلوث البكتيرى او الفطرى0 تم اختبار الامان للقاح من بقايا الفيروس المسبب للعدوى وقد وجد ان الفيروس المثبط خال من اى نشاط تلازن دموى 0تم تحضير فيروس الاجهاض المعدى من العتره المجفده والمعزوله محليا والممرره تمريرتين على خلايا كلى القرد الاخضر الافريقى وذلك بتمريرها ثلاث تمريرات على خلايا كلى القرد الاخضر الافريقى VEP5)) وتمت معايرة الفيروس وقد وجد ان القوه العياريه للفيروس (log10 TCID50/ ml 8)تم تثبيط الفيروس باستخدام بينارى ايثيلين امين تركيز نهائى (0,008) مول عند درجة حراره 37مئويه لمدة 24ساعه وباختبار نقاوه محلول الفيروس المثبط فقد وجد ان الفيروس خال من التلوث البكتيرى او الفطرى و باختبار الامان وذلك باختبار بقايا الفيروس المسبب للعدوى فقد وجد ان الفيروس المثبط لا يسبب تاثير مرضى على خلايا كلى القرد الاخضر الافريقى.اما بالنسبه لتوكسيد التيتانوس فقد تم الحصول على توكسيد التيتانوس من قسم الامصال والانتيجينات بمعهد الامصال واللقاحات البيطريه بالعباسيه بقوه عياريه 80 LF ( limit of flocculation)/mlتم اضافة كميات متساويه لكل من فيروسى انفلونزا الخيول و الاجهاض المعدى المثبطين وتوكسيد التيتانوس مع اضافة الهيدراجل 20% والصابونين 1مج/ جرعه و تم توزعيها على زجاجات بكميات 4 ملل/ زجاجه/جرعه.وباختبار الامان فى الخيول و الفئران والارانب الهندي فقد ثبت ان اللقاح امن فى كل من الخيول والفئران والارانب الهندي وذلك بعدم حدوث اجهاضات أو ظهور اى اعراض موضعية أو عامة غير مرغوب فيها باستثناء تورم بسيط فى مكان الحقن وذلك فى الارانب الهندى.تم إختبار اللقاح المركب فى الأرانب الهندى ومقارنتة بكل لقاح على حدا. تم حقن مجموعات (ا- ب- ج- د- هـ) بلقاح انفلونزا الخيول, الإجهاض المعدى للخيول, توكسيد التتانوس واللقاح المركب على التوالى مع ترك المجموعة الاخيرة كضابط للتجربة. وقد ثبتت كفاءة اللقاحات فى الارانب الهندى من حيث الامان والقدره على إنتاج مستوى عالى من الاجسام المناعية للانفلونزا باستخدام اختبار التلازن الدموى المثبط والإجهاض المعدى للخيول باستخدام اختبار الاليزا والاجسام المناعية للتيتانوس باستخدام اختبار السيرم التعادلى. كما ثبتت كفاءة اللقاح المركب بنفس الدرجة تقريبا لكل لقاح منفصل.تم عمل اختبار الثبات الحرارى للقاح عن طريق عدد من الزجاجات قسمت الى مجموعتين الاولى حفظت فى درجة حرارة 4 مئويه لمدة 12 شهر والثانيه حفظت فى درجة حرارة 25مئويه لمدة عام وتم عمل اختبار الاليزا والتلازن الدموى المثبط والتعادل المصلى للمجموعتين كل 3 شهور(0-3-6-9-12) شهر. كما تم عمل مجموعه وضعت فى نفس الظروف كضابط. ومن النتائج تبين ان اللقاح يمكن حفظه عند 4مئويه لمدة عام وعند 25مئويه لمدة 3 شهور.تم متابعة الحاله المناعيه فى مجموعه من الافراس المحقونه بلقاح مركب من انفلونزا الخيول والاجهاض المعدى وتوكسيد التيتانوس والمحفز بالصابونين وهيدروكسيد الالومنيوم لمدة 18 شهر وذلك باستخدام الاختبارات الاتيه:1-اختبار التلازن الدموى المثبط2-اختبار الاليزا3-اختبار التعادل المصلى4-اختبار تثبيت المتمم.تم حقن اللقاح المركب فى مجموعة من الخيول بجرعتين بينهما4 أسابييع والجرعة الثالثة تم حقنها بعد 6 شهور من الجرعة الأولى.وقد تم متابعة الاجسام المناعيه ضد مرض انفلونزا الخيول بواسطة اختبار التلازن الدموى المثبط وقد وجد انها ظلت حاميه ضد المرض منذ الحقنه الأولى حتى الأسبوع الرابع بعد التحصين، وقد أعطيت الجرعة التنشيطية في الأسبوع الرابع للتحصين وأعطت حمايه حتى الشهر السادس للتحصين، أما الجرعة الثالثة فقد أعطيت في الأسبوع السادس للتحصين، وأعطت حمايه حتى الشهر الثامن عشر للتحصين.وبقياس متوسط مستوى الأجسام المناعية بواسطة اختبار الإليزا ظهر أن الأجسام المناعية ضد الإجهاض المعدى للخيول فكانت حامية ضد المرض حتى الأسبوع الثالث للتحصين، وبإعطاء الجرعة التنشيطية في الأسبوع الرابع للتحصين كانت الأجسام المناعية حامية حتى الشهر السادس للتحصين، وبإعطاء الجرعة الثالثة في الشهر السادس للتحصين أعطت حمايه حتى الشهر الرابع عشر للتحصين.أما بالنسبة للأجسام المناعية لمرض الإجهاض المعدى والتي قيست باستخدام اختبار تثبيت المتمم أصبحت هذه الأجسام حامية منذ الحقنة الأولى حتى الأسبوع الثالث للتحصين، وبإعطاء الجرعة التنشيطية عند الأسبوع الرابع للتحصين فقد أصبحت حامية حتى الشهر الرابع للتحصين، وبإعطاء الجرعة الثالثة عند الشهر السادس للتحصين أصبحت هذه الأجسام حامية حتى الشهر التاسع للتحصين.أما بالنسبة لمتوسط الأجسام المناعية ضد التيتانوس فقد قيست باستخدام اختبار التعادل المصلى وأصبحت حامية ضد المرض منذ الحقنة الاولى وحتى الأسبوع الرابع للتحصين، وقد أعطيت الجرعة التنشيطية عند الأسبوع الرابع للتحصين فأعطت حماية حتى الشهر السادس للتحصين، وبإعطاء الجرعة الثالثة عند الشهر السادس للتحصين فقد أعطت حماية حتى الشهر الثامن عشر للتحصين.ومن النتائج السابقه يتضح لنا:ان اللقاح المركب المثبط ضد فيروسى إنفلونزا الخيول والإجهاض المعدى وتوكسيد التيتانوس والمحفز بالجل و الصابونين قد ثبتت كفاءته من حيث الامان والقدره على إنتاج مستوى عالى من الاجسام المناعية و احتفظ بكفاءته المناعية عند درجة 04م لمدة 12 شهر وعند درجة حرارة الغرفة لمدة 3شهور.كما احتفظت الخيول بمستوى من الاجسام المناعية اعلى من معدل الحماية حتي 12شهر لكل من الإنفلونزا و التيتانوس وحتى 6 شهور لهربس الخيول- 1 بعد الجرعة الثالثة وعلية يكون نظام التحصين الأولى كالاتى ثلاث جرعات باللقاح المركب المثبط ضد فيروسى إنفلونزا الخيول والإجهاض المعدى وتوكسيد التيتانوس ومحفز بالجل والصابونين (جرعتين بينهما 4 أسابييع والجرعة الثالثة بعد 6 شهور من الجرعة الأولى) يتبعه تحصين تبادلى بلقاح الإجهاض المعدى فى الخيول ثم اللقاح المركب كل 6 شهور وذلك لحفظ أعلى درجة من الحماية ضد فيروسى الإجهاض المعدى وإنفلونزا الخيول و التيتانوس.