![]() | Only 14 pages are availabe for public view |
Abstract أجريت هذه الدراسة لعزل وتوصيف فيروس التدهور السريع للموالح (CTV) ودراسته علي المستوي البيولوجي والسيرولوجي والجزيئي للتوصل لطرق تشخيصية فائقة الحساسية وسريعة للكشف عن وجوده وكذا استخدام التقنيات الجينومية لدراسة كيفية استجابة النبات العائل للإصابة بالفيروس. سجلت الأعراض المختلفة للإصابة بفيروس CTV في الحقل وتم عرض صور لها وتبين وجود 329 عينة مصابة بالفيروس من أصل 442 عينة موالح تم تجميعها من عدد 35 مكان مختلف من الأراضي الزراعية في 7 محافظات مصرية حيث سجلت أعلي نسبة إصابة في محافظة القليوبية (88.88%) وأقل نسبة إصابة في محافظة الإسماعيلية (37.50%), فيما كانت نسب الإصابة في باقي المحافظات هي (الشرقية - 086.5%), (الدقهلية - 84.41%), (كفر الشيخ - 46.66%), (البحيرة - 43.10%) و (الإسكندرية - 40.60%), وبفحص القطاعات فائقة الدقة من النباتات المصابة بالميكروسكوب الالكتروني النافذ ثبت وجود جزيئات شبيه بالفيروس ووجود أجسام مغزلية الشكل وأجسام ليفية, بالإضافة إلي تراكم حويصلات سيتوبلازمية وأيضا حدوث تشوهات لكل من البلاستيدة الخضراء والنواة وإلي جانب العديد من التأثيرات علي الشكل الخلوي للخلية المصابة. وجد أن جزيئات الفيروس خيطية الشكل بأبعاد 2000 X11 نانوميتر وتم عرض صور له, وباستخدام الاجسام المضادة المتخصصة وكذلك الجزيئات المنقاه من ال CTV ثبت وجود قطعة وحيدة من البروتين كان وزنها الجزيئي 25 كيلو دالتون تقريبا وهي التي تشير إلي الغلاف البروتيني الفيروسي وذلك من خلال تقنية ال WBIA وكذلك تم انتاج مصل مضاد لفيروس CTV و تقدير نقطة التخفيف النهائية الخاصة به باستخدام اختبار الإليزا الغير مباشر وكانت 1 / 6400 للإدماء الأول وكانت 1/3200 للإدماء الثاني والثالث وأظهرت الدراسة الجزيئية التي تمت علي الجينوم الفيروسي وباستخدام اختبار الاستنساخ العكسي وتفاعل البلمرة المتسلسل وجد أن البادئ المتخصص له القدرة علي تكبير جزء cDNA طوله 700 زوجا من النيوكليتيدات وتم تسجيله في بنك الجينات العالمي تحت رقم دخول KY110486 . ومن التحليل الإحصائي لإيجاد درجة التقارب, أظهرت نتائج التتابع النيوكليتيدي أن السلالة المصرية من محافظه الدقهلية سجلت نسبة تشابه تصل إلي 83% مع سلالات من اسبانيا وايطاليا وأمريكا واليونان والمكسيك, في حين وجود تقارب 60% مع السلالة المصرية من قها والمسجلة من قبل في بنك الجينات وهذا ما اكدته شجرة التقارب الوراثي للأحماض الأمينية المتحصل عليها وجود عنقودين يحتوي أحدهما علي العزلة المصرية (الدقهلية) والآخر يحتوي علي العزلة المصرية الأخرى (قها), وتم عزل عدد 49 حزمة جينية تم إنتاجها من نبات الموالح و26 حزمة جينية تم تثبيطها من الفيروس والتي من الممكن أن يكون لهم دور في استجابة نبات الموالح للإصابة الفيروسية. |